武汉华联科生物|实验操作
你是否了解过悬尾试验?这是一种被广泛用于评估啮齿类动物抑郁样行为的经典实验方法,尤其在抗抑郁药物筛选及抑郁模型验证中发挥着重要作用。今天,我们就来详细了解一下悬尾试验。
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悬尾试验的基本原理在于模拟一种动物无法逃脱的应激情境。实验中,小鼠被倒挂于悬尾支架上,由于无法逃脱这种不适状态,它们会表现出强烈的挣扎行为。然而,当小鼠意识到逃脱无望时,会逐渐进入一种“绝望”状态,停止挣扎,身体保持垂直倒悬的静止状态。这种不动状态的持续时间被用作衡量动物抑郁程度的指标,不动时间越长,通常认为抑郁程度越重。
适应实验环境
将小鼠从SPF饲养环境中取出,并让其在实验环境中适应10-15分钟,以减少环境应激对实验结果的影响。
使用医用胶带将小鼠尾巴(距尾尖约1cm处)轻轻固定于悬尾支架上,确保小鼠头部朝下,与悬尾箱底面保持约30cm的距离。
将小鼠悬空5-6分钟。在这段时间内,密切观察小鼠的行为表现。
记录小鼠在悬空期间的运动、挣扎、缩卷等行为反应,这些将用于后续的数据分析。
根据小鼠在悬空期间表现出的行为反应,评估其焦虑抑郁行为水平。
肢体不动不挣扎
小鼠停止挣扎,身体保持垂直倒悬状态,静止不动。这一指标可视为实验小鼠出现习得性无助后放弃挣扎的行为表现,不动时间越长,抑郁程度越重。
挣扎时间的长短反映了小鼠在面临挑战时的动力和兴趣。挣扎时间短可能意味着缺乏足够的动力去尝试摆脱困境,是抑郁症状的一个标志。
正常情况下,小鼠在悬空时会表现出一定的运动活跃度,如尝试移动、调整姿势等。而抑郁小鼠则可能缩成一团或几乎不动,缺乏探索或逃避的动机。
尾巴卷曲程度也可能反映小鼠的焦虑或抑郁情绪。实验期间尾巴卷曲程度明显增强可能是小鼠在紧张或不安时的一种自我保护行为。
保持环境安静
实验环境应保持安静,避免突然或持续的噪音使实验动物惊慌失措。
建议实验时长不超过6分钟,以避免时间过长对小鼠造成过度压力。
选择合适的小鼠
选择同批次、同龄、同种类、同性别的小鼠进行实验,以减少个体差异对实验结果的影响。
胶带缠绑位置
应缠在接近动物尾巴尖端的地方,避免缠在靠近尾巴根部,以免影响实验结果。
底部放置托盘
底部建议放置一个可拆卸的托盘,用于收集粪便或尿液,保持实验环境的整洁。
数据分析
在分析实验数据时,需要考虑实验组和对照组之间的差异,以确保实验结论的可靠性。