心肌缺血再灌注损伤模型

2019-02-28 16:08:56 admin 623

心肌缺血再灌注损伤模型

模型制作方法：

（1）小鼠腹腔注射麻醉，待麻醉生效后，采用自制小鼠插管（20G静脉套管针外鞘及自制导丝，长度30mm）行气管插管，成功后接小鼠呼吸机控制呼吸（频率是90~110次/min,潮气量0.3~0.4ml）。

（2）胸骨左侧切开皮肤，此处有静脉，用止血钳夹下即可不出血。钝性分离肌肉见肋骨，在第3肋间隙用眼科剪轻轻向下分离肋间肌，很多参考文献报道剪断3、4肋骨，用拉钩拉开胸壁。华联科动物实验平台经过多次实验后做了优化，用2个撑开器配合在第3肋间隙撑开，可以做到不出一滴血，见图：

（3）小心剪开心包膜，用棉签轻压住心脏。在左心耳下缘3~4mm进针，进针深约1.5mm，斜向右上方肺动脉圆锥方向出针，针距约3~4mm，分别将线两端穿入小圈内。留线暂不结扎（因缝针刺激心脏会出现心律失常）。稳定3-5分钟后再收紧结扎线，连同小段聚已烯管结扎（起压迫血管作用）。立即观察心电图，以出现QRS高大增宽为结扎成功标志（S-T段不一定可见改变，见文献），记时缺血时间。40分钟后轻拉松结线，打开血管再灌注，立即观察心电图，数分钟后应该出现QRS回落变窄。再灌注180分钟，注意观察再灌注心律失常.
闭胸逐层缝合：

（4）术后维持体温直接影响到成活率，可用电热毯维持体温。26-28℃之间：

（5）见排尿可拔管，气管处一针缝合，再缝合皮肤，放回笼观察。
（6）TTC和Evans blue双染图：
Evans blue染液注射后取心脏，可明显看到缺血区域：
小鼠双染图：

大鼠双染图：