华联科学术论文《抑制 USP22 基因对人结直肠癌细胞增殖的影响》已成功见刊

2020-04-16 17:20:23 hlk 34

喜讯


热烈祝贺武汉华联科生物“亮剑”项目组成功在《中国现代医学杂志》上发表学术论文《抑制 USP22 基因对人结直肠癌细胞增殖的影响》并取得了业内的广泛关注!从2019年6月中旬到2020年4月16日已被下载118次,下载量及引用量均高于同类文章。

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结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是常见的消化道肿瘤之一。2019年全球范围内结直肠癌新增发病率和死亡率均分别位于男女性癌症病例的第三位。在结肠癌的化疗治疗中,癌细胞对常见的化疗药物易产生耐药性,严重影响到了患者的生存几率。因此,深入阐明CRC耐药的分子机制,筛选安全、无毒的天然药物,对CRC的治疗具有重要的意义。
既往研究发现:泛素特异性肽酶22(USP22)是癌细胞产生耐药性重要的变化分子。为此,华联科生物利用RNAi干扰技术分析USP22表达抑制后,结直肠癌细胞的增殖能力的影响,为后续进一步研究USP22提供基础。
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实验对象


   结直肠癌组织芯片;HCT-116、SW480、HT-29细胞



实验方法


1

免疫荧光检测USP22表达


2

细胞培养及传代


3

WB检测结直肠癌细胞中USP22表达


4

WB检测USP22 siRNA干扰效率 

5

细胞活力检测


6

细胞周期检测


7

细胞凋亡检测


8

WB检测各指标表达


实验结果


01

USP22siRNA降低USP22的表达

USP22siRNA 转染SW480细胞,作用24 h后检测USP22的表达量。对照组、NC组及USP22 siRNA组USP22相对表达量(相对GAPDH)分别为(0.98± 0.15)、(0.94±0.22)和(0.30±0.02)。结果具有统计学意义(P<0.05)。

02

USP22抑制后增殖能力变化情况

各组细胞在不同时间条件下 OD 值的变化 (x±s)

组别

12h

24h

48h

72h

96h

对照组

0.41±0.02

0.67±0.01

0.79±0.06

0.95±0.04

1.24±0.05

NC组

0.41±0.01

0.63±0.03 

0.74±0.06

0.84±0.02

1.07±0.07 

USP22 siRNA 组

0.41±0.02

0.43±0.01 

0.48±0.03

0.56±0.06

0.65±0.04

03

USP22 抑制后细胞周期的变化情况

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04

USP22抑制后细胞凋亡变化

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本研究使用 RNAi 的方法探索抑制 USP22对于结直肠癌细胞增殖的影响,结果发现USP22 表达量的减少可以增加 G0/G1 期的细胞比例,使结直肠癌细胞周期停滞在G /G 期,从而抑制细胞的周期进程。本研究也发现USP22被抑制后可以增加结直肠癌细胞的凋亡比例,说明USP22可以影响结直肠癌细胞的凋亡。
综上所述,USP22抑制后,能够抑制结直肠癌细胞的增殖,其机制可能与抑制细胞周期进程,促进细胞凋亡有关。本研究结果可以为筛选USP22作为治疗结直肠癌的靶标提供理论依据,但具体的作用机制以及相关通路需要更进一步的研究。

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