在血清市场上有一品牌一直占有垄断地位,但去年因为进口问题,该品牌货期不定,有很多客户想买也买不到,而且价格奇高,任性到过万元一瓶的。
这个事情给了科研人员一个启示就是血清要多一个选择,说不定哪一天它再跟你任性一会,也是够难受的。
天津灏洋TBD推出了优级胎牛血清,价格实惠,500ml官网报价1575元,现华联科生物推出10月特惠活动买2送1。
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牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
1,提供对维持细胞批数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2,提供结合蛋白,能识别维生素,脂类,金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活性。
3,有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4,是细胞贴壁,铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5,超酸碱度缓冲液作用。
6,提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
关于血清常见问题回复:
建议血清应保存在-2O℃。若一次无法用完一瓶,无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。将血清从冷冻箱取出后,置于2~8℃冰箱使之缓慢融解,一般是融解过夜。
沉淀主要成分是纤维蛋白和脂蛋白,不会影响血清品质,但必须去除,因为沉淀会影响细胞与细胞之间的联系,诱导细胞聚集,影响细胞贴壁等。
解冻后,首先混匀血清,4℃静置30min - 1h,让沉淀自然沉降到瓶底,中上层无沉淀血清直接转出使用,下层血清装到50ml无菌离心管, 1000rpm(约400g),离心3分钟即可除去 。当沉淀较少且较难离心去除时(一般是脂蛋白),建议过滤去除。
一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在2周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。
实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
若非必须,可以不需要做热处理这一步。不但节省时间,更确保血清的质量!
一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。
如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:
(1)细胞生长过老,破碎的细胞残骸;
(2)血清质量不好,反复冻融的结果;
(3)配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;
(4)培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。