线粒体膜电位检测/ROS活性氧检测

实验原理

ROS活性氧检测:利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧的检测。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF,检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。

线粒体膜电位检测(JC-1):JC-1为阳离子脂质荧光染料,有单体和多聚体两种存在状态,两者的发射光谱不同。正常健康线粒体的膜电位(△y)具有极性,JC-1依赖于△y的极性被迅速摄入线粒体内,并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体,多聚体发射光为红色荧光;而细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去极化,JC-1从线粒体内释放,红光强度减弱,以单体的形式存在于胞质内,发绿色荧光。

实验流程【线粒体膜电位检测(JC-1)】

线粒体膜电位检测.png

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